外周血单核细胞
外周血单核细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是血液中最大的血细胞，单个核细胞是具有单个核的细胞。来源于骨髓中的造血干细胞，并在骨髓中发育，最终进入血液中随着血液循环传代至全身各个部位。
主要是通过Ficoll-hypaque（聚蔗糖－泛影葡胺）密度梯度离心法，利用不同颗粒之间存在沉降系数差时，在一定离心力作用下，各自以一定速度沉降，在密度梯度不同区域上形成区带的方法，再获取目的区域的细胞。下面简单介绍一下实验操作和注意事项。
实验步骤
1、外周血的获取和处理：通常从生物体内获取其外周血，并向获得的外周血中添加抗凝剂（肝素、EDTA、枸橼酸钠等）混合均匀，防止血液凝结；
2、先向离心管中添加适量的Ficoll分离液，再将混合好的外周血轻缓的加入到分离液上方（二者体积比可以使用1:1、2:1等）；
3、配平后放入离心机内进行离心，设置好合适的离心参数（一般采用1500rpm/min；离心20min；实际需要根据物种以及添加量进行调整），注意升速和降速加速度不宜过快；
4、离心结束后轻缓取出离心样本，在无菌环境下吸取白膜(PBMC)层。
注意事项
实验中需要注意到的细节也有很多，不同失误也可能造成不同实验结果：
1、离心结束后，管底红细胞较多，PBMC层较预期相差很多：（排除样本本身的原因）Ficoll分离液需要使用前恢复至室温状态再进行使用，低温下Ficoll分离液可能会有固体物质析出，导致分离液密度降低，使得分离效果变差，所有细胞沉降至最底层；
补救措施：可以通过收集白膜层及以下所有液体，再加入三倍体积的PBS混合后1500rpm/min离心10min收集所有细胞沉淀再使用原血液样本等体积的PBS重悬细胞沉淀，重新进行分离进行补救；
2、离心结束后最上层血浆澄清但白膜层、Ficoll层、红细胞层分布不均：样本浓度较高导致过载造成分离效果不佳；
补救措施：可以通过收集白膜层及以下所有液体，再加入三倍体积的PBS混合后1500rpm/min离心10min收集所有细胞沉淀再使用2-3倍体积的PBS重悬细胞沉淀，重新进行分离进行补救；
3、血浆层有絮状物或呈现偏红：絮状物的析出一般为蛋白析出或者为脂肪凝集，偏红则可能是溶液造成；
补救措施：一般对实验结果影响不大，偏红主要是溶血造成，需要关注外周血的运输和保存条件。