很多培养细胞的同学都反映在培养过程中出现了黑色点状，条状物质，经验较少的同学就会很惊慌，觉得是不是就是一些污染，是不是染菌了，但是经验丰富的老炮都知道，这里面的门道有多深！
“黑点”分类
1、非污染物的黑点物质——培养体系里不稳定的内含物沉淀，死亡细胞的碎片，细胞的分泌物等。
图1 MGC-803人胃癌细胞
图1中的红色方框框出来的黑色点状物就是上面所说的非污染物的“黑点”物质
2、自主快速游动的黑点物质——外来的不明微生物，细菌污染物等
Ncm460大量不明游动黑点
“黑点”问题的改善措施
1. 离心分离：对于悬浮细胞，可以通过离心（300-600 rpm，5-6分钟）去除细胞碎片和上清液，然后更换新的培养瓶。对于贴壁细胞，可以使用PBS润洗2-3次，轻轻拍打培养瓶以去除贴壁不牢的碎片和颗粒，再进行消化处理。
2. 控制传代时机：掌握细胞传代的最佳时机，避免细胞老化或过度生长，减少血清冻融次数，以降低黑点的产生。
3. 优化培养基条件：确保培养基的pH值适宜，避免过高或过低影响细胞生长。此外，选择高质量的血清，并根据需要调整血清浓度。
4. 防止污染：定期检测和筛查污染，保持环境清洁和无菌操作，使用75%乙醇消毒培养基和其他试剂瓶子的外表面。如果怀疑是微生物污染，可以使用抗生素处理。
5. 多次传代：对于原代细胞中的杂质，多次传代可以消除这些小黑点。
6. 更换培养基和条件：如果上述方法无效，可以考虑更换培养基和培养条件。
如果是污染风险去除措施
BC-BA04-1mL黑胶虫清除试剂
“黑胶虫”是一种在细胞培养中常见的污染物，其具体身份和来源在学术界存在争议。一些研究认为黑胶虫是一种微生物，可能是细菌、真菌或原虫等。例如，有研究通过16S rDNA鉴定技术将黑胶虫归类为短波单胞菌属的新菌株，命名为Brevundimonas sp. GYBL3（如视频）。然而，也有观点认为黑胶虫可能并非真正的生物体，而是无机物，如玻璃培养瓶中的硅颗粒。
黑胶虫污染通常表现为细胞培养基中出现黑色颗粒，这些颗粒在显微镜下会进行布朗运动。这种污染会对细胞生长产生不利影响，导致细胞状态变差、生长缓慢甚至死亡。因此，清除黑胶虫污染是实验室中的一项重要任务。森贝伽&生航黑胶虫清除试剂（BC-BA04）可以有效的控制和杀灭血清、培养基、细胞中的大部分种类“黑胶虫”，几乎不影响细胞本身的生长增殖，同时对常见的细菌也有一定的清除作用，保证细胞实验的顺利进行。