细胞上皮间质转化中的作用及机制-技术前沿-资讯-生物在线

细胞上皮间质转化中的作用及机制

作者:上海一研生物科技有限公司 2018-12-19T10:07 (访问量:5142)

首先通过免疫组织化学技术检测甲状腺乳头状癌组织芯片中癌组织与癌旁组织中TFF3和Snail的表达情况。统计分析Snail表达与临床资料如病理分期、肿瘤大小及淋巴结转移情况间的相关性。统计分析TFF3与Snail表达的相关性。

然后通过细胞划痕实验检测沉默TFF3后甲状腺乳头状癌细胞shRNA-TFF3-TPC-l细胞株(shRNA-TFF3)、shRNAC-TPC-1细胞株(shRNAC)和TPC-1细胞株迁移运动能力变化;Transwell侵袭实验检测沉默TFF3后甲状腺乳头状癌细胞shRNA-TFF3-TPC-l细胞株(shRNA-TFF3)、shRNAC-TPC-1细胞株(shRNAC)和TPC-1细胞株侵袭能力变化;克隆形成实验检测沉默TFF3后甲状腺乳头状癌细胞shRNA-TFF3-TPC-l细胞株(shRNA-TFF3)、shRNAC-TPC-1细胞株(shRNAC)和TPC-1细胞株克隆形成能力变化。
最后通过实时定量PCR实验检测shRNA-TFF3-TPC-l细胞株(shRNA-TFF3)、shRNAC-TPC-1 y胞株(shRNAC)、和TPC-1细胞株中EMT标志物(Snail、Slug、E-cad的变化;免疫细胞化学染色实验分别检测shRNA-TFF3-TPC-l细胞株(shRNA-TFF3)、shRNAC-TPC-1细胞株(shRNAC)和TPC-1细胞株中EMT标志物(Snail、Slug、E-cadherin、N-cadherin)及MAPK通路相关蛋白ERK1/2的变化;免疫印迹技术实验检测shRNA-TFF3-TPC-l细胞株(shRNA-TFF3)、shRNAC-TPC-1细胞株(shRNAC)和TPC-1细胞株中EMT标志物(Snail、Slug、E-cadherin、N-cadherin)及MAPK通路相关蛋白ERK1/2和p-ERKl/2的变化。
结果显示:TFF3在PTC中高表达,癌旁组织中阴性/低表达;Snail在PTC中高表达,癌旁组织中阴性/低表达。Snail积分吸光度值为0.5331+0.0190 V5 0.0976+0.0026(P<0.001),TFF3积分吸光度值为0.4614+0.1031 V50.0812+0.006(P<0.001)。Snail表达与临床病理分期(尸=0.007,r=0.6978),肿瘤大小(P=0.002,r=0.738),淋巴结转移(尸=0.037,/*=0.651)呈正相关;Snail与TFF3表达高度相关(P=0.001,r=0.8006)。
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