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Ludger 产品分析流程---N、O糖,唾液酸,单糖分析流程

作者:英国Ludger生物科技有限公司 暂无发布时间 (访问量:4449)

N、O糖,唾液酸,单糖分析

多糖可在两小时内标记于2AA 或2AB。这标记试剂盒采用一种无毒的还原试

剂----2-甲基吡啶硼烷(2-PB),比之前有毒性的氰基氢硼化钠更安全。而这项技术

Ludger 已获得独家专利。

Ludger 提供的无毒2AA(货号:LT-KAA-VP24) 和2AB(货号:LT-KAB-VP24) 多糖标记试剂盒具有以下特点:

1、已通过ICH Q2(R1)认证,进行过β 因素测试

2、精确度高,相对峰面积超过5%,其CVs 是少过5%;相对峰面积低于5%,其

CVs 是少过8%;

3、标记效果与现有有毒性的2-AA 标记试剂盒和2-AB 试剂盒相当;

4、试剂盒含有两个预混合瓶,一瓶是醋酸和DMSO 溶液,另一瓶是有2-PB 的

2-AB 或者2-AA 标记物,因此标记过程简单。

5、2h 内完成标记。

N-多糖分析

 

第一步:释放多糖

(用阱解释放试剂盒:LL-HYDRAZ-A2 用于从糖蛋白释放N-/O-多聚糖,4-10℃避光保存)

E-PNG01糖基肽酶(N 糖苷肽酶F)多糖释放酶

E-PNG05糖基肽酶(N 糖苷肽酶F)多糖释放酶

 

第二步:标记(无毒的2AA2AB与有毒的2AA2AB在原理,用法,时间,仪器上有何优势或区别?竞争对手是否也有无毒的2AA2AB

2-AA 多糖标记试剂盒 LT-KAA-A2  规格:2 Reaction Sets 2-AA 染料标记多糖,发射波长

为360nm,室温避光储存

无毒2-AA 多糖标记试剂盒,2PB 作为还原剂 LT-KAA-VP24 规格:1 kit containing

2 Reaction Sets

2-AB 多糖标记试剂盒LT-KAB-A2  2-AB 染料标记多糖,室温避光储存 规格: 1 kit containing 2 Reaction Sets

无毒2-AB 多糖标记试剂盒,2PB 作为还原剂 规格: 1 kit containing 2 Reaction Sets

 

 

 

第三步:纯化

S 多糖纯化柱 LC-S-A6 用于从混合物中分离多糖成分,包括Ludger 荧光和发色基

团标记的多糖, 纯化2-AB 标记的多糖的传统方法 规格:6 units/pack

 

T1 多糖纯化柱(含真空多联支架) LC-T1-A6用于荧光和发色基团标记的多糖纯化,适合纯化2-AA 和2-AB标记的多糖,用于真空歧管系统,同时可以处理多达96 个样本。规格:6 cartridges

 

 

 

第四步:用HPLC,UHPLC或MALDI MS分析

 

高分辨酰胺色谱柱 LS-N2-4.6x150 规格:1 column 用于Ludger 荧光和发色基团标记多糖的高效液相色谱分析。

40 倍甲酸铵缓冲液,pH 4.4 LS-N-BUFFX40,规格:1 bottle, 50ml 用于酰胺或HILIC(亲水相互作用)的液相色谱分析

 

C3 效液相色谱柱 LS-C3-7.5x75 规格:1 column 用于带电荷多糖分析

4 倍甲酸铵缓冲液, pH 9  LS-C-BUFFX4 规格:1 bottle, 50ml 用于带电荷多糖分析

 

多糖标准品(标记的/未标记的)-在HPLC或MALDI MS分析中用于参照糖蛋白或多糖文库-用于做标准品或对照品。

 

碳水化合物单糖:

定量单糖标准品(6种单糖混合物:葡萄糖胺, 半乳糖胺, 半乳糖, 甘露糖,葡萄糖和岩

藻糖 ))CM-MONOMIX-10定量唾液酸标准品(NouGc和NouAc) :CM-NEU-GC-01 N-羟乙酰神经氨酸定量标准品 和CM-NEU-AC-01 N-乙酰神经氨酸定量标准品 鉴定Nou5,9Ac2:CM-NEU5,9,AC-01

梯度葡萄糖同聚物-用作系统适用性标准品和校准GU值。

内切糖苷酶-和LS-N2高分辨酰胺色谱柱(用于Ludger 荧光和发色基团标记多糖的高效液相色谱分析)一起用来测定具体结构序列。

 

O-多糖分析

 

第一步:释放多糖

用阱解释放试剂盒:LL-HYDRAZ-A2 用于从糖蛋白释放N-/O-多聚糖,4-10℃避光保存

 

第二步:标记

2-AA 多糖标记试剂盒 LT-KAA-A2  规格:2 Reaction Sets 2-AA 染料标记多糖,发射波长

为360nm,室温避光储存

无毒2-AA 多糖标记试剂盒,2PB 作为还原剂 LT-KAA-VP24 规格:1 kit containing

2 Reaction Sets

2-AB 多糖标记试剂盒LT-KAB-A2  2-AB 染料标记多糖,室温避光储存 规格: 1 kit containing 2 Reaction Sets

无毒2-AB 多糖标记试剂盒,2PB 作为还原剂 规格: 1 kit containing 2 Reaction Sets

 

第三步:纯化

 

S 多糖纯化柱 LC-S-A6 用于从混合物中分离多糖成分,包括Ludger 荧光和发色基

团标记的多糖, 纯化2-AB 标记的多糖的传统方法 规格:6 units/pack

 

T1 多糖纯化柱(含真空多联支架) LC-T1-A6用于荧光和发色基团标记的多糖纯化,适合纯化2-AA 和2-AB

标记的多糖,用于真空歧管系统,同时可以处理多达96 个样本。规格:6 cartridges

 

第四步:用HPLC,UHPLC或MALDI MS分析

HILIC-HPLC分析获得峰值:LS-N2-4.6 x150, 高分辨酰胺色谱柱, 用于Ludger 荧光和发色基团标记多糖的高效液相色谱分析.缓冲液:LS-N-BUFF x40  40 倍甲酸铵缓冲液,pH 4.4, 用于酰胺或HILIC(亲水相互作用)的液相色谱分析

 

基于带负电荷分析的WAX-HPLC:LS-C3-7.5 x75, C3 高效液相色谱柱, 用于带电荷多糖分析.缓冲液:LS-C-BUFF x4, 4 倍甲酸铵缓冲液, pH 9, 用于带电荷多糖分析.

 

 

多糖标准品(标记的/未标记的)-在HPLC或MALDI MS分析中用于参照糖蛋白或多糖文库-用于做标准品或对照品。

 

碳水化合物单糖:

定量单糖标准品(6种单糖混合物:葡萄糖胺, 半乳糖胺, 半乳糖, 甘露糖,葡萄糖和岩

藻糖 ))CM-MONOMIX-10定量唾液酸标准品(NouGc和NouAc) :CM-NEU-GC-01 N-羟乙酰神经氨酸定量标准品 和CM-NEU-AC-01 N-乙酰神经氨酸定量标准品 鉴定Nou5,9Ac2:CM-NEU5,9,AC-01

梯度葡萄糖同聚物-用作系统适用性标准品和校准GU值。

内切糖苷酶-和LS-N2高分辨酰胺色谱柱(用于Ludger 荧光和发色基团标记多糖的高效液相色谱分析)一起用来测定具体结构序列。

 

 

单糖分析

第一步:释放多糖,第二步:标记

单糖释放标记试剂盒LT-MONO-96 规格: 1 kit containing 2 Reaction Sets

用于从糖蛋白生物药品中释放中性和氨基单糖,同时2-AA 染料标记

 

A2G2S2 量化糖肽标准品BQ-GPEP-A2G2S2规格10 μg(标记前后作为对照用的?)

 

第三步:纯化  第四步:用HPLC,UHPLC或MALDI MS分析

 

HPLC柱:LS-R2-4.6x150,R2 高效液相色谱柱,用于2-AA 标记单糖分析。

UHPLC柱:LS-UR2-2.1x50,R2 超高效液相色谱柱-单糖,用于2-AA 标记单糖分析。

溶剂:LS-R-BPTX10,10 倍BPT 溶液,用于单糖液相色谱分析。

 

多糖标准品(标记的/未标记的)-在HPLC或MALDI MS分析中用于参照糖蛋白或多糖文库-用于做标准品或对照品。

 

碳水化合物单糖:

定量单糖标准品(6种单糖混合物:葡萄糖胺, 半乳糖胺, 半乳糖, 甘露糖,葡萄糖和岩

藻糖 ))CM-MONOMIX-10定量唾液酸标准品(NouGc和NouAc) :CM-NEU-GC-01 N-羟乙酰神经氨酸定量标准品 和CM-NEU-AC-01 N-乙酰神经氨酸定量标准品 鉴定Nou5,9Ac2:CM-NEU5,9,AC-01

梯度葡萄糖同聚物-用作系统适用性标准品和校准GU值。

内切糖苷酶-和LS-N2高分辨酰胺色谱柱(用于Ludger 荧光和发色基团标记多糖的高效液相色谱分析)一起用来测定具体结构序列

 

 

唾液酸分析

第一步:释放多糖,第二步:标记

 

唾液酸释放DMB 标记试剂盒LT-KDMB-A1,规格1 kit containing

1 Reaction Set  用于从糖蛋白中释放唾液酸,DMB 染料标记

 

A2G2S2 量化糖肽标准品BQ-GPEP-A2G2S2规格10 μg(标记前后作为对照用的?)

 

 

第三步:纯化   第四步:用HPLC,UHPLC或MALDI MS分析

 

HPLC柱:LS-R1-4.6x150,R1 高效液相色谱柱,用于DMB 标记唾液酸分析。

UHPLC柱:LS-UR2-2.1x100,uR2 超高效液相色谱柱-唾液酸,用于DMB 标记唾液酸分析

 

多糖标准品(标记的/未标记的)-在HPLC或MALDI MS分析中用于参照糖蛋白或多糖文库-用于做标准品或对照品。

 

碳水化合物单糖:

定量单糖标准品(6种单糖混合物:葡萄糖胺, 半乳糖胺, 半乳糖, 甘露糖,葡萄糖和岩

藻糖 ))CM-MONOMIX-10定量唾液酸标准品(NouGc和NouAc) :CM-NEU-GC-01 N-羟乙酰神经氨酸定量标准品 和CM-NEU-AC-01 N-乙酰神经氨酸定量标准品 鉴定Nou5,9Ac2:CM-NEU5,9,AC-01

梯度葡萄糖同聚物-用作系统适用性标准品和校准GU值。

内切糖苷酶-和LS-N2高分辨酰胺色谱柱(用于Ludger 荧光和发色基团标记多糖的高效液相色谱分析)一起用来测定具体结构序列。

 

 

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