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细胞培养之胚胎干细胞培养

作者:上海拜力生物科技有限公司 2013-08-20T20:04 (访问量:9226)

细胞培养之胚胎干细胞培养

1、ES细胞的培养方法与已分化的成体细胞有相当大的不同,由于ES细胞具有快速增殖和有序分化的潜能,为获得全能性的ES细胞,在用培养基保证其生长扩增的同时,必须有效地阻止ES细胞的分化。
2、在使用常用培养基MEM-delter、DMEM、TCM-199,F-12等,伴随使用饲养细胞层。
3、饲养细胞层是被阻断有丝分裂后的单层成纤维细胞,其分泌的成纤维细胞生长因子(FGF)等促有丝分裂因子可促进ES细胞的增殖,分泌的白血病抑制因子(LIF)等可抑制ES细胞的分化。
4、条件培养基就是从某些培养细胞回收的培养液,其中含有能使ES细胞增殖和分化抑制的因子,用于制备条件培养基的有细胞 有BRL、HBC-5637、PSA-1,PC10-6R和T3细胞等。
5、也可以将饲养细胞层或条件培养基中的分化抑制因子如LIF等分离纯化,单独或与饲养细胞层共同使用以维持ES细胞未分化状态和生长、增殖。
6、对培养的ES细胞的鉴定,主要根据ES细胞的标志酶(碱性磷酸酶)或抗原(SSEA-3、SSEA-4)以及ES细胞分化能力的检测。
(拜力生物编辑T整理 http://www.bioon.com.cn/show/reagent_77360_c3049.html)
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