质粒提取及基因克隆服务
最终提供:克隆构建的质粒及含有该质粒的菌种;可提供载体酶切位点简图或VectorNTI图谱,提供测序及序列比对结果、实验操作步骤。样品要求:基因组DNA(≥1 μg)、质粒(≥100 ng)
稳定细胞株构建
生博提供:载体构建服务,也可以针对构建好的外源质粒DNA进行稳定筛选。针对质粒DNA的抗性标志,选择相应的药物,并对所需筛选的细胞进行药物测试,选择细胞全部凋亡时药物的最低浓度。
cDNA文库构建技术服务
cDNA文库在研究某类特定细胞中基因组的表达状态及表达基因的功能鉴定方面具有特殊优势,在个体发育、细胞分化、细胞周期调控、细胞衰老和死亡调控等研究中具有广泛的应用价值,是研究工作中最常用到的文库。
构建MTB突变菌株(基因敲除法)
采用噬菌体介导的同源重组进行基因敲除:首先构建同源交换位点(AES),随后将其整合到结核分枝杆菌噬菌体基因组,获得噬菌粒(phasmid);将噬菌粒导入耻垢分枝杆菌,获得整合有同源交换位点的重组噬菌体,经体外扩增获得高滴度的重组噬菌体,对结核分枝杆菌进行转染;