英文名称：Calcein Red™ AM
产品参数：
Ex (nm)     562       Em (nm)      576
分子量      1015.79   溶剂          DMSO
存储条件    在零下15度以下保存, 避免光照
产品规格    1mg
产品货号    21900
产品概述：
钙黄绿素红,AM是美国AAT Bioquest生产的用于检测活细胞的荧光探针，Calcein AM是用于标记和检测活细胞细胞功能的流行的荧光探针之一。
然而，Calcein AM的单色使得在多色应用中不可能使用这种有价值的试剂。
例如，由于与GFP相同的颜色，不可能将Calcein AM与GFP-转化细胞组合使用。
为了解决Calcein AM的这种颜色限制，我们开发了Calcein Orange ，Calcein Red 和Calcein Deep Red 。
这些新的Calcein AM类似物与Calcein AM结合使用，可以对活细胞进行多色标记和功能分析。
非荧光Calcein Red AM可以轻松进入活细胞并水解产生强荧光Calcein Red 染料。可以使用常见的TRITC / Cy3滤波片组检测Calcein Red 染料。
​​​​​​​百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的钙黄绿素红,AM。 
光谱：



2.适用仪器
流式细胞仪
Ex:532/561 nm
Em：585/40   nm 
荧光显微镜
Ex:       TRITC 滤波片组
Em：    TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板

荧光酶标仪
Ex:540 nm
Em：590 nm
Cutoff：570 nm
推荐孔板:黑色透明底板
读取模式：底读模式

3.实验方案：
操作步骤
1.准备HHBS缓冲液，10％Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Calcein Red AM原液。
2.1使用Calcein Red AM的量：1毫克
2.2所需浓度：2 mM
2.3在合适的容器中，将1mg Calcein Red TM AM与492.23μL无水DMSO混合。
3.使用10μMCalceinRed AM 4在HHBS中制备2X工作溶液，0.08％Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1终孔内浓度的Calcein Red AM：5μM
3.2Pluronic®F-127的终井内浓度：0.04％
3.3终孔内浓度的丙磺舒：1mM
3.4在合适的容器中，混合16μL的Calcein Red AM，25.6μL的10％Pluronic F-127和256μL的25mM丙磺舒。然后，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为3.2 mL。
注意：对于大多数细胞系，我们建议Calcein Red AM的终度为4至5μM。
注意：推荐的Pluronic F-127孔浓度为0.02％至0.04％。
注意：推荐的浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
 
4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X，并将每种组分的终浓度调节至以下：5μM的Calcein Red AM，0.04％Pluronic F-127,1mM丙磺舒。
5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-60分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液（或您选择的缓冲液）。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。然后，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为4 mL。
7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先，从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS（或您选择的缓冲液）。 
8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 560/574 nm运行实验

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