细胞转染即将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术,是分子生物和细胞生物学最常见的实验技术。
有多种方法可进行细胞转染,外源基因进入细胞主要方法有:脂质体转染、磷酸钙法、病毒转染、电击法及显微注射等, 各个方法的原理及特点如下:
转染方法 | 原理 | 应用 | 特点 |
脂质体转染 | 阳离子脂质体表面带正电荷,能与核酸的磷酸根通过静电作用,将DNA分子包裹入内,形成DNA脂复合物,也能被表面带负电的细胞膜吸附,再通过融合或细胞内吞进入细胞 | 瞬转/稳转 | 实验操作简单,重复性搞,细胞毒性低,适用性广 |
磷酸钙法 | 磷酸钙DNA复合物吸附细胞膜被细胞内吞 | 瞬转/稳转 | 实验条件控制严格,难度较大,且不适用于原代细胞 |
病毒转染 | 利用病毒携带目的基因片段,感染目的细胞,主要有慢病毒、腺病毒、逆转录病毒和腺相关病毒 | 瞬转/稳转 | 转染效率高,可用于难转染的细胞及原代、悬浮细胞,病毒包装难度较大 |
电穿孔法 | 电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内 | 瞬转 | 适用性广,但细胞致死率高,DNA和细胞用量大 |
显微注射 | 使用一根超细的针头讲DNA,RNA或蛋白直接注入细胞质或细胞核 | 瞬转/稳转 | 适用这种方法的细胞不多,技术复杂设备昂贵 |
利用脂质体转染试剂及病毒感染是最为常见的讲外源基因导入细胞的方法,转染试剂用量大,可以说是基础科研的必备试剂之一。但鉴于进口试剂成本支出高,那物美价廉的国货转染试剂是否存在呢?
其实国产与进口试剂的pk一直源源不断,大多进口试剂以质量优,口碑好占据上风,国产试剂也经历了数十年的发展,深知科研工作的艰辛与不易,在共同为科研事业奋斗的出发点下,国内的科研公司也做了很多努力。
汉恒生物自主研发的转染试剂LipoFiter推出已有6年,受到了很多科研工作者的认可,汉恒实验室建立了IOS9001质量体系,拥有中科院博士研发团队,目前使用LipoFiter发表的文献多达数百篇(部分见后文)。
18年汉恒推出了第三代转染试剂:LipoFiter 3 ,经验证,和市面上常见的一些进口试剂相比,操作简单毒性低,感染效率更高。
附:
汉恒LipoFiter客户发表文献节选:
名称 | 杂志名称 | IF | 单位 |
Hippo signaling promotes JNK-dependent cell migration | PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA (PNAS) |
9.661 | 同济大学生命科学与技术学院 |
A novel epigenetic AML1‐ETO/THAP10/miR‐383 mini‐circuitry contributes to t(8;21) leukaemogenesis | EMBO Molecular Medicine | 9.249 | 中国人民解放军总医院 |
A Human Proteome Array Approach to Identifying Key Host Proteins Targeted by Toxoplasma Kinase ROP18 | MOLECULAR & CELLULAR PROTEOMICS | 6.54 | 中山大学 |
CAF-secreted CXCL1 conferred radioresistance by regulating DNA damage response in a ROS-dependent manner in esophageal squamous cell carcinoma | Cell Death & Disease | 5.965 | 杭州省肿瘤医院 |
Adeno-associated virus 9–mediated Cdk5 inhibitory peptide reverses pathologic changes and behavioral deficits in the Alzheimer’s disease mouse model | FASEB JOURNAL | 5.498 | 南方医科大学南方医院 |
Direct inhibition of ACTN4 by ellagic acid limits breast cancer metastasis via regulation of β-catenin stabilization in cancer stem cells | Journal of Experimental & Clinical Cancer | 5.289 | 中山大学 |
Synthetic Bax-Anti Bcl2 combination module actuated by super artificial hTERT promoter selectively inhibits malignant phenotypes of bladder cancer | Journal of Experimental & Clinical Cancer Research | 5.189 |
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