革兰氏染色的方法-分析方法-资讯-生物在线

革兰氏染色的方法

作者:上海延慕实业有限公司 2016-08-26T00:00 (访问量:1915)

    革兰氏染色的方法

    试剂 生化试剂 细菌先经碱性染料结晶紫染色,再经碘液媒染(以增加染料与细胞的亲和力)后,用酒精或丙酮脱色,再用复染色剂染色。不被脱色而保持原颜色者为革兰纸阳性菌(G+);被脱色后又被染上复染剂的颜色者为革兰氏阳性菌(G-)。此法可将细菌分为两大类。

    革兰氏染色的机理主要是利用两类细菌的细胞壁成分和结构不同。革兰氏阴性菌的细胞壁中含有较多的类脂质,而肽聚糖的含量较少。当用乙醇或丙酮脱色时,类脂质被溶解,增加了细胞壁的通透性,使初染后的结晶紫和碘的复合物易于渗出,结果细胞被脱色,经复染后,又染上复染液的颜色;而革兰氏阳性菌细胞壁中肽聚糖的含量多且交联度大,类脂质含量少,经乙醇或丙酮洗脱后,肽聚糖层的孔径变小,通透性降低,因此,细胞仍保留初染时的颜色。

    【实验材料、药品及器具】

    1、菌种:大肠杆菌(Escherichiacoli),枯草芽孢杆菌(BacillusSubtilis),金黄色葡萄球菌(Staphylococeusauresu)

    2、染液:草酸铵结晶紫液,革兰氏碘液,95%的酒精,藏花红液

    3、器皿洗净的载玻片6片、显微镜、酒精灯、接种环、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、镊子、玻璃缸、瓶装蒸馏水

    【实验步骤】

    1、取培养12-24h的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌分别涂片、固定。

    2、加草酸铵结晶紫染色剂一滴,染色1分钟。

    3、倾去染液并用洗瓶装水轻轻冲洗。

    4、加碘液染1分钟,水洗,然后用吸水纸吸干。

    5、将载玻片略倾斜,滴加95%酒精脱色(洗至流下的酒精中无紫色时为止),然后水洗。

    6、加藏花红复染,染色30分钟,水洗,用吸水纸吸干或烘干。

    7、用油镜镜检观察。

上海延慕实业有限公司 商家主页

地 址: 上海浦东新区川沙经济园区

联系人: 洛辰

电 话: 13621980056

传 真: 021-50760790

Email:272967093@qq.com

相关咨询

上海延慕-实验耗材 PCR耗材 (2017-01-06T16:10 浏览数:8142)

进口ELISA试剂盒好还是国产ELISA试剂盒好 (2016-12-30T15:37 浏览数:9126)

上海延慕:elisa试剂盒定性和定量测定 (2016-12-23T16:38 浏览数:8930)

elisa试剂盒全场特价,火热进行中! (2016-12-14T16:38 浏览数:7970)

ELISA不常见样本的处理方法 (2016-12-08T13:09 浏览数:8026)

上海延慕详述:甲基异烟酰醛盐酸盐 (2016-11-23T11:55 浏览数:8444)

上海延慕解答:细胞培养相关常见问题 (2016-11-03T16:21 浏览数:8847)

上海延慕:如何保存血清 (2016-10-19T17:10 浏览数:7694)

延慕详述:脂质体3000 (2016-10-11T11:20 浏览数:8053)

上海延慕详述:中性蛋白酶作用及功效? (2016-09-30T16:00 浏览数:7303)

ADVERTISEMENT